[发明专利]一种从婴儿胎盘中提取造血干细胞的方法在审
| 申请号： | 201911176706.2 | 申请日： | 2019-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN110734892A | 公开（公告）日： | 2020-01-31 |
| 发明（设计）人： | 胡俊杰 | 申请（专利权）人： | 深圳科学之门生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073;C12N5/0789 |
| 代理公司： | 11357 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 杨敬 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种从婴儿胎盘中提取造血干细胞的方法，所述方法包括以下步骤：冲洗、过滤，将滤渣进行冷冻，胎盘剪碎，然后用酶解液消化胎盘组织；消化时间为30‑40min；将酶解组织过滤，分别得到滤液和滤渣，得到细胞悬液；然后经过搅拌混合后离心，加入培养基，得到造血干细胞。本发明将冲洗得到的滤液和滤渣进行冷冻，冷冻时间‑10℃，且每0.5天降温3℃。使得滤渣的质量得到保证，滤渣在存放的过程中，提高了滤渣内的细胞存活率，使得提取的造血干细胞可以长时间保存，造血干细胞的质量得到了保障；同时，本发明设计的造血干细胞的提取方法简单，且通过实验证明得到的干细胞存活率高，有利于推广使用。 | ||
| 搜索关键词： | 滤渣 造血干细胞 冷冻 胎盘 冲洗 过滤 细胞存活率 消化 时间保存 胎盘组织 细胞悬液 存活率 培养基 干细胞 酶解液 剪碎 酶解 婴儿 保证 | ||
【主权项】：
1.一种从婴儿胎盘中提取造血干细胞的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n一、取多个婴儿胎盘，在无菌条件下使用0.9％的氯化钠溶液逐个冲洗1-2min，将得到的冲洗液A进行检测，并标记相对应的胎盘；/n二、取其中一个检测合格的冲洗液，并将其相对应的婴儿胎盘使用0.9％的氯化钠溶液冲洗6-8min，得到冲洗液B；/n三、将冲洗液A和冲洗液B混合、过滤，得到滤渣，将滤渣进行冷冻；/n四、将步骤二得到的婴儿胎盘使用消毒后的医用剪刀剪碎，然后用酶解液消化胎盘组织，消化时间为30-40min；/n五、将步骤四得到的酶解后的组织过滤2-3次，分别得到滤液和滤渣，将滤液静置5-10小时，取出上清液，得到细胞悬液；/n六、将步骤三得到的冷冻物取出，自然融化至0-5℃，将其和步骤五中的细胞悬液混合，然后在混合物中加入步骤五中的滤渣，搅拌混合后静置2-3小时，取出上层的上清液，将得到的细胞悬液备用；/n七、将步骤六得到的细胞悬液使用离心机一次离心，取出上清液，加入培养基中1-2小时，再使用离心机二次离心，取出上清液，得到造血干细胞。/n
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