[发明专利]一种简易高效的葛根多倍体诱导方法有效
申请号: | 201911177417.4 | 申请日: | 2019-11-27 |
公开(公告)号: | CN110731266B | 公开(公告)日: | 2020-06-23 |
发明(设计)人: | 严华兵;曾文丹;尚小红;肖亮;曹升;陆柳英;谢向誉 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区农业科学院 |
主分类号: | A01H1/08 | 分类号: | A01H1/08;A01H4/00 |
代理公司: | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人: | 王雪 |
地址: | 530007 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明涉及植物育种技术领域,具体涉及一种简易高效的葛根多倍体诱导方法。一种简易高效的葛根多倍体诱导方法,其包括外植体处理、无菌苗培养、丛生芽诱导、茎节伸长培养、多倍体诱导、嵌合体分离和纯系筛选等步骤。本发明先利用幼嫩的藤蔓进行培养获得无菌苗,然后诱导无菌苗获得丛生芽,再利用培养基对获得的丛生芽继续培养,得到茎节较长的组培苗;通过该方法可以获得茎节较长的单芽茎段,使单芽茎段也可以作为诱导的材料,丰富了现有的葛根多倍体诱导材料,提高了诱导的工作效率;另外利用葛根单芽茎段作为诱导材料的诱导率高于茎尖。 | ||
搜索关键词: | 一种 简易 高效 葛根 多倍体 诱导 方法 | ||
【主权项】:
1.一种简易高效的葛根多倍体诱导方法,其特征在于,包括以下步骤:/nS1.外植体处理:选取生长健壮、无病虫害的幼嫩藤蔓,先用0.1%升汞浸泡消毒6-10min,然后用无菌水冲洗4-5次,最后用无菌滤纸吸干茎段表面水分备用;/nS2.无菌苗培养:在无菌条件下,将经过S1处理的藤蔓切成单芽茎段,将生物学下端垂直竖插于初代培养基中培养28-30d,获得无菌苗;/nS3.丛生芽诱导:在无菌条件下,将无菌苗转接到丛生芽诱导培养基中培养20-25d,获得丛生芽;/nS4.茎节培养:在无菌条件下,将丛生芽转接到茎节伸长培养基中培养25-30d,获得茎节较长的葛根组培苗;/nS5.多倍体诱导:在无菌条件下,将茎节较长的葛根组培苗先切成单芽茎段转接到诱导剂液体培养基中进行震荡培养48h-72h;/nS6.嵌合体分离:在无菌条件下,将经过S5处理的单芽茎段用无菌水冲洗干净,然后转接到嵌合体分离培养基上培养,然后挑选变异植株将其单芽茎段用茎节伸长培养基连续进行4-6次的继代培养;/nS7.纯系筛选:取经过S6培养的整株叶片,进行倍性鉴定,筛选出多倍体纯系材料。/n
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