[发明专利]一种大鼠烟气吸入暴露后尿液的致突变检测方法有效
| 申请号： | 201911191721.4 | 申请日： | 2019-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN110656154B | 公开（公告）日： | 2022-11-25 |
| 发明（设计）人： | 蔡继宝;苏加坤;郭磊;徐达;罗娟敏;尚平平;李翔;谢复炜 | 申请（专利权）人： | 江西中烟工业有限责任公司 |
| 主分类号： | C12Q1/04 | 分类号： | C12Q1/04;C12R1/42 |
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| 地址： | 330096 江西省南昌市*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种大鼠烟气吸入暴露后尿液的致突变检测方法，包括尿液酶解、过柱和萃取、洗脱、浓缩、Ames试验微量波动法和结果判定共六个步骤，其中尿液酶解采用乙酸钠‑乙酸缓冲液调节控制pH环境，过柱时依次用甲醇和水预处理，并在去离子水冲洗后用甲醇洗脱，经浓缩后采用Ames试验微量波动法检测并判定结果，该方法可以显著降低传统Ames试验所需的尿液检测量，并提高检测灵敏度，尤其适用于大鼠烟气暴露模型的生物学检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大鼠 烟气 吸入 暴露 尿液 突变 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种大鼠烟气吸入暴露后尿液的致突变检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1.尿液酶解/n将预先收集的尿样解冻至室温，取5 mL于玻璃瓶中，依次加入8~15mL 乙酸钠-乙酸缓冲液和50 µL β-葡萄糖醛酸酶，混合均匀后放入恒温水浴槽中，在37 ℃下避光酶解14~20h；/nS2.过柱和萃取/n称取XAD-2吸附剂1.05±0.05 g，置入层析柱内，首先用甲醇5~10mL浸润萃取，近流完时，加入5~10mL水来进行预处理，近流完时，加入酶解的尿样；/nS3.洗脱/n加入去离子水5~8 mL冲洗层析柱，洗去尿液中存在的组氨酸，弃去冲洗液，随后加入10~15mL甲醇于层析柱，洗脱XAD-2吸附剂上的尿液物质；/nS4.浓缩/n洗脱液放入氮吹仪，直至吹干，加入100 μL的二甲基亚砜（DMSO）萃取残留物；/nS5.Ames试验微量波动法/n鼠伤寒沙门氏菌TA98过夜培养后，将菌液稀释至1~2×10
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