[发明专利]一种提高神经营养因子NT-3碱性蛋白产量的蛋白改造方法在审
申请号: | 201911206091.3 | 申请日: | 2019-11-29 |
公开(公告)号: | CN110862447A | 公开(公告)日: | 2020-03-06 |
发明(设计)人: | 刘伟林;刘姗姗;汤建民;吴昔阳;张高英;赵红洲 | 申请(专利权)人: | 武汉赛维尔生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/48 | 分类号: | C07K14/48;C12N15/12;C12N15/70 |
代理公司: | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 | 代理人: | 徐晓琴 |
地址: | 430060 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明属于基因技术和微生物技术领域,具体涉及一种提高神经营养因子NT‑3碱性蛋白产量的蛋白改造方法,包括:以小鼠肝脏组织或脑组织提取的RNA经反转录制备的cDNA模板,以F1/R1为引物对,通过点突变扩增技术将原始基因序列中“第22位~第28位”的碱基序列“CGAGGAG”同义突变成“CGCGGCG”;将改造后的基因片段构建到pET 32a表达载体中,再转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白诱导表达,纯化获得神经营养因子NT‑3碱性蛋白。经本发明所述方法改造后的基因序列在诱导表达神经营养因子NT‑3碱性蛋白时获得了分子量大小符合预期的目的蛋白,实现了神经营养因子NT‑3碱性蛋白的正常表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 神经 营养 因子 nt 碱性 蛋白 产量 改造 方法 | ||
【主权项】:
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