[发明专利]分泌番茄斑驳花叶病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用

摘要

本发明公开了一种分泌抗番茄斑驳花叶病毒(Tomato mottle mosaic virus，ToMMV)单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用。以提纯的ToMMV病毒粒子为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能分泌抗ToMMV单抗的杂交瘤细胞株2D6，其保藏号为CGMMC NO.18846。该细胞株分泌单抗腹水间接ELISA效价达10‑8，其与ToMMV发生特异性免疫反应，而不与同属的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus，TMV)和番茄花叶病毒(Tomato mosaic virus，ToMV)反应。利用2D6单抗建立检测番茄植株中ToMMV的ACP‑ELISA、dot‑ELISA和Tissue print‑ELISA检测方法，其中ACP‑ELISA和dot‑ELISA方法检测病叶的灵敏度分别达到1:40,960和1:20,480倍稀释(w/v,g/mL)。分泌ToMMV高质量单抗杂交瘤细胞株的创制及该病毒血清学检测方法的建立为ToMMV的诊断和检测、流行病学调查及科学防控提供物质和技术支撑。