[发明专利]重组载体、菌株、水稻纹枯病菌效应蛋白的表达纯化方法在审
| 申请号： | 201911235119.6 | 申请日： | 2019-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN110904139A | 公开（公告）日： | 2020-03-24 |
| 发明（设计）人： | 李帅;魏松红;周建铭;向世博;海樱凡;王应玲;邢帆 | 申请（专利权）人： | 沈阳农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C07K14/375;C07K1/22;C07K1/14;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京君泊知识产权代理有限公司 11496 | 代理人： | 李丹 |
| 地址： | 110000 辽宁省沈阳市沈*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组载体、菌株、水稻纹枯病菌效应蛋白的表达纯化方法，属于生物技术领域。该重组载体用于表达水稻纹枯病菌效应蛋白；所述的重组载体是通过将水稻纹枯病菌效应蛋白的编码基因插入到pET‑32a载体的EcoRI与XhoI酶切位点之间得到的；所述水稻纹枯病菌效应蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示；所述水稻纹枯病菌效应蛋白的编码基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。本发明通过将带有重组载体的菌株进行活化培养后，再添加异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷诱导目的蛋白表达，然后通过使用蛋白溶解缓冲液溶解目的蛋白后，再通过不同的缓冲液进行多次洗脱以及透析处理后，便可获得浓度较高的水稻纹枯病菌效应蛋白溶液。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 载体 菌株 水稻 病菌 效应 蛋白 表达 纯化 方法 | ||
【主权项】：
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