[发明专利]一种基于RsaI单酶切gluA基因区分克罗诺杆菌属不同种的分子分型方法在审
申请号: | 201911250639.4 | 申请日: | 2019-12-09 |
公开(公告)号: | CN110699474A | 公开(公告)日: | 2020-01-17 |
发明(设计)人: | 叶应旺;汪馨;沈益忠;张丹凤;蒋秀婷;董晶晶 | 申请(专利权)人: | 合肥工业大学 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/683;C12Q1/04;C12R1/01 |
代理公司: | 34114 合肥金安专利事务所(普通合伙企业) | 代理人: | 金惠贞 |
地址: | 230009 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明涉及一种基于RsaI单酶切 | ||
搜索关键词: | 杆菌属 杆菌 菌属 菌种 基因片段 扩增 酶切 食品微生物检验 多态性图谱 特异性引物 分子分型 指纹图谱 差异性 单酶切 分型 菌杆 菌株 异性 溯源 验证 基因 污染 | ||
【主权项】:
1.一种基于RsaI单酶切gluA基因区分克罗诺杆菌属不同种的分子分型方法,其特征在于操作步骤如下:/n(1)扩增基因片段/n选用克罗诺杆菌特异性gluA基因,所述gluA基因为克罗诺杆菌α-葡萄糖苷酶基因;/n用一对扩增引物F:5’- AGGGATCCTGAAAGCAATCGACAAGAA -3’;/nR:5’- CCGAAGCTTACTCATTACCCCTCCTGATG -3’;/n对克罗诺杆菌特异性gluA基因扩增,得到克罗诺菌属六种不同菌的gluA基因片段,/n(2)酶切扩增产物/n采用RsaI限制性内切酶对扩增得到的六种不同菌的gluA基因片段的扩增产物分别进行酶切,获得克罗诺菌属六种不同菌的差异性PCR-RFLP指纹图谱,克罗诺菌属六种不同菌分别为:1.阪崎克罗诺杆菌(
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