[发明专利]一种HPLC法一测多评测定芒果止咳片6种成分含量的方法

摘要

本发明公开了一种HPLC法一测多评测定芒果止咳片6种成分含量的方法，本发明采用HPLC法，色谱柱为Phenomenex Gemini C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈(B)‑0.1％磷酸水溶液(A)；梯度洗脱；流速1.0mL/min；检测波长：258nm，柱温30℃；一测多评法以没食子酸为内参物，分别建立原儿茶酸、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷和异槲皮苷的相对校正因子(RCF)，通过RCF计算其含量，并将其测定值与外标法测定结果进行对比分析，本发明提供的一测多评法与外标法测定结果并无显著差异(P＞0.05)，各相对校正因子重复性良好，本发明所建立的高效液相色谱含量测定及一测多评法可用于芒果止咳片中该6个成分的含量测定，且方法准确可靠，重复性好，可用于芒果止咳片的质量控制。

主权项

1.一种HPLC法一测多评测定芒果止咳片6种成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)对照品溶液的制备：分别取没食子酸、原儿茶酸、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷和异槲皮苷对照品适量，精密称定，加70％甲醇溶解，制成含没食子酸、原儿茶酸、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷、异槲皮苷的质量浓度分别为1.830mg/mL、0.1010mg/mL、2.613mg/mL、0.3623mg/mL、0.1554mg/mL、0.07480mg/mL的混合对照品溶液，备用；/n(2)供试品溶液的制备：取芒果止咳片20片，去糖衣，精密称定总片重，研细，取其粉末0.3g，精密称定，精密加入70％甲醇25mL，超声40min，滤过，残渣精密加入70％甲醇25mL，超声40min，滤过，合并滤液，水浴挥干，残渣加70％甲醇溶解，定容至10mL容量瓶，摇匀，13000r/min离心10min，取上清液作为供试品溶液；/n(3)阴性供试品溶液的制备：按处方工艺制备缺芒果叶的阴性样品，取适宜的芒果叶阴性样品，并按步骤(2)制备得芒果叶阴性对照溶液；/n(4)系统适应性试验：分别取混合对照品溶液、芒果止咳片供试品溶液和芒果叶阴性对照溶液，按一定的色谱条件进样分析测定，理论塔板数按金丝桃苷峰计算应不少于120000；/n(5)标准曲线的绘制：精密吸取步骤(1)制得的混合对照品溶液适量，分别置于5mL容量瓶中，加70％甲醇稀释至刻度，摇匀，分别制得6个不同浓度的混合对照品溶液，取上述对照品溶液，按一定的色谱条件进样5μL分析测定，记录峰面积，以质量浓度(μg/mL)为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，绘制标准曲线；/n(6)精密度试验：分别精密吸取步骤(1)制得的混合对照品溶液1.25mL置于5mL容量瓶中，70％甲醇稀释至刻度，摇匀；按一定的色谱条件进样，连续进样6次，记录峰面积及保留时间；/n(7)稳定性试验：精密称取芒果止咳片样品0.3g，按步骤(2)的方法制备供试品溶液，按一定的色谱条件进样分析，分别在0h、2h、4h、8h、12h、24h进样，记录峰面积及保留时间；/n(8)重复性试验：精密称取芒果止咳片粉末6份，每份0.3g，按步骤(2)的方法制备得6份供试品溶液，按一定的色谱条件进样5μL测定分析，记录相应峰面积；/n(9)加样回收试验：精密称取各组份含量已知的芒果止咳片粉末0.15g，共6份，分别精密加入含没食子酸、原儿茶酸、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷、异槲皮苷的混合对照品溶液3.00ml，按步骤(2)的方法制备供试品溶液，在一定的色谱条件下进样5μL分析。/n