[发明专利]一种猪瘟病毒与非洲猪瘟病毒双重荧光PCR检测试剂、试剂盒和检测方法在审
| 申请号： | 201911276696.X | 申请日： | 2019-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN110760620A | 公开（公告）日： | 2020-02-07 |
| 发明（设计）人： | 王金涛;孙东波;宋伟红;郑家三;李春秋;邢晓旭;陈国福;刘光前;师庆伟;佟玲;刁彩霞 | 申请（专利权）人： | 黑龙江八一农垦大学;黑龙江省农垦科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 23206 哈尔滨龙科专利代理有限公司 | 代理人： | 高媛 |
| 地址： | 163316 黑*** | 国省代码： | 黑龙;23 |
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| 摘要： | 一种猪瘟病毒与非洲猪瘟病毒双重荧光PCR检测试剂、试剂盒和检测方法，属于动物病原检测领域。本发明针对猪瘟病毒5’‑UTR基因和非洲猪瘟病毒P72基因，分别设计并筛选出能覆盖所有毒株，又适合双重检测的引物和探针，包括二对特异性引物和二条特异性探针；本发明还记载了包含该引物和探针的试剂盒以及利用该引物和探针的PCR检测方法；本发明通过引物设计和PCR各组分的调整，在敏感性和特异性均不降低的前提下，实现一次分析，同时检测和区分猪瘟病毒与非洲猪瘟病毒的目的，不仅减少了检测的工作量和成本，且能大大节省检测的时间，为疫病防治赢得宝贵时间。 | ||
| 搜索关键词： | 非洲猪瘟病毒 猪瘟病毒 探针 引物 检测 试剂盒 双重荧光PCR 特异性探针 特异性引物 动物病原 检测领域 检测试剂 双重检测 一次分析 疫病防治 引物设计 基因 毒株 工作量 筛选 覆盖 | ||
【主权项】：
1.一种猪瘟病毒与非洲猪瘟病毒双重荧光PCR检测试剂，其特征在于：针对猪瘟病毒5’-UTR基因和非洲猪瘟病毒P72基因，分别设计并筛选出能覆盖所有毒株，又适合双重检测的引物和探针，包括二对特异性引物和二条特异性探针，扩增目的片段长度分别为94bp和249bp，引物和探针序列为：/n猪瘟病毒：/n上游引物CSFV-F：5’-TGCCCAYAGTAGGACTAG-3’/n下游引物CSFV-R：5’-CTACTGACGACTGTCCTG-3’/n探针CSFV-P：5’-TGGCGAGCTCCCTGGGTGGTCTA-3’/n非洲猪瘟病毒：/n上游引物ASFV-F：5’-GATACCACAAGATCTGCCGT-3’/n下游引物ASFV-R：5’-CTGCTCATGGTATCAATCTTATCG-3’/n探针ASFV-P：5’-CCACGGGAGGAATACCAACCCAGTG-3’/n所述探针CSFV-P和探针ASFV-P在5’端分别标记不同的荧光报告基团，所述探针CSFV-P和探针ASFV-P在3’端均标记相同或不同的荧光淬灭基团。/n
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