[发明专利]一种猪圆环病毒2b亚型Cap蛋白的原核可溶性表达方法在审
| 申请号： | 201911309242.8 | 申请日： | 2019-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN111087452A | 公开（公告）日： | 2020-05-01 |
| 发明（设计）人： | 汪洋;丁耀忠;李国秀;欧云文;代军飞;李茜;马炳;张杰;侯谦;刘永生 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C07K14/01 | 分类号： | C07K14/01;C12N15/66;C12N15/70;C07K19/00 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人： | 贾慧娜 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种猪圆环病毒2b亚型Cap蛋白的原核可溶性表达方法，以PCV2毒株基因组为参考序列，在PCV2b的Cap蛋白编码基因上游偶联SUMO促溶表达标签编码基因，在SUMO的上游引入6个His标签编码基因，优化基因，重组至PUC57质粒，以重组质粒为模板，设计特异性引物，经PCR扩增后产物克隆入pMAL‑C4x原核表达载体，构建重组质粒，转入大肠杆菌进行诱导、纯化。本发明成功构建了pMAL‑MBP‑HisSUMO‑Cap重组表达载体，MBP‑HisSUMO‑Cap融合蛋白在BL21(DE3)中可实现可溶性表达，纯化后MBP‑HisSUMO‑Cap融合蛋白作为免疫原，能与PCV2b阳性猪血清、兔抗MBP‑tag多克隆抗体和免疫小鼠抗血清均能发生特异性反应，表明其具有较好的免疫原性，为PCV2b诊断试剂盒的研发奠定了理论基础。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 圆环 病毒 cap 蛋白 可溶性 表达 方法 | ||
【主权项】：
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