[发明专利]一种谷氨酸脱氢酶突变体、编码基因及制备L-草铵膦的方法有效

专利信息
申请号: 201911337691.3 申请日: 2019-12-23
公开(公告)号: CN113088500B 公开(公告)日: 2022-08-30
发明(设计)人: 杨立荣;周海胜;陆利兵;吴坚平;张红玉 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12N9/06 分类号: C12N9/06;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/04;C12R1/19
代理公司: 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 代理人: 沈金龙
地址: 310013 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了一种谷氨酸脱氢酶突变体、编码基因及制备L‑草铵膦的方法。本发明通过定向进化与半理性设计相结合的分子改造方法,显著提高了源于Clostridium difficile的谷氨酸脱氢酶对PPO的催化活力;解决了还原胺化法制备L‑草铵膦工艺中NADH特异性谷氨酸脱氢酶酶活几乎没有酶活的问题;本发明谷氨酸脱氢酶突变体对PPO的催化活力显著提高,LB培养基摇瓶发酵的酶活最高达16.14U/mL;本发明谷氨酸脱氢酶突变体在L‑草铵膦的制备中,表现出良好的催化效率,底物转化率99%,L‑草铵膦浓度最高达83.6g/L,ee值99%,具有非常大的工业应用前景;本发明成功的解决了氨化还原反应制备L‑草铵膦过程中的生物催化剂活力低和辅酶稳定性的关键问题,为实现该工艺的工业化应用奠定了基础。
搜索关键词: 一种 谷氨酸 脱氢酶 突变体 编码 基因 制备 草铵膦 方法
【主权项】:
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