[发明专利]一种谷氨酸脱氢酶突变体、编码基因及制备L-草铵膦的方法有效
申请号: | 201911337691.3 | 申请日: | 2019-12-23 |
公开(公告)号: | CN113088500B | 公开(公告)日: | 2022-08-30 |
发明(设计)人: | 杨立荣;周海胜;陆利兵;吴坚平;张红玉 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/04;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 沈金龙 |
地址: | 310013 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种谷氨酸脱氢酶突变体、编码基因及制备L‑草铵膦的方法。本发明通过定向进化与半理性设计相结合的分子改造方法,显著提高了源于Clostridium difficile的谷氨酸脱氢酶对PPO的催化活力;解决了还原胺化法制备L‑草铵膦工艺中NADH特异性谷氨酸脱氢酶酶活几乎没有酶活的问题;本发明谷氨酸脱氢酶突变体对PPO的催化活力显著提高,LB培养基摇瓶发酵的酶活最高达16.14U/mL;本发明谷氨酸脱氢酶突变体在L‑草铵膦的制备中,表现出良好的催化效率,底物转化率99%,L‑草铵膦浓度最高达83.6g/L,ee值99%,具有非常大的工业应用前景;本发明成功的解决了氨化还原反应制备L‑草铵膦过程中的生物催化剂活力低和辅酶稳定性的关键问题,为实现该工艺的工业化应用奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 谷氨酸 脱氢酶 突变体 编码 基因 制备 草铵膦 方法 | ||
【主权项】:
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