[发明专利]一种滋养细胞及其制备方法和在NK细胞扩增中的应用在审
| 申请号： | 201911384110.1 | 申请日： | 2019-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN111073856A | 公开（公告）日： | 2020-04-28 |
| 发明（设计）人： | 张明智;张旭东;李兆明;吴少璇;王鹦君 | 申请（专利权）人： | 郑州大学第一附属医院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N5/0783 |
| 代理公司： | 郑州中原专利事务所有限公司 41109 | 代理人： | 李想;王唤霞 |
| 地址： | 450000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明提供一种滋养细胞及其制备方法和在NK细胞扩增中的应用。一种滋养细胞的制备方法，包括以下步骤：（1）构建MBIL21的序列及构建表达MBIL21的显示绿色荧光的慢病毒质粒；（2）构建用T2A连接的CD86和CD137L的序列和带有嘌呤霉素抗性的慢病毒质粒；（3）将步骤（2）获得的慢病毒质粒进行包装，提取慢病毒感染k562细胞，逐渐增加嘌呤抗性的浓度，筛选出具有抗性的k562‑CD86‑CD137L细胞，并采用低浓度嘌呤霉素维持培养；（4）将步骤（1）获得的慢病毒质粒进行包装，提取慢病毒感染步骤（3）得到的k562‑CD86‑CD137L细胞，用流式分选仪分选出具有绿色荧光标志的细胞，k562‑CD86‑CD137L‑MBIL21细胞，即为该滋养细胞。本发明从外周血单个核细胞中直接扩增NK细胞，便于操作，为研究原代NK细胞提供了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 滋养 细胞 及其 制备 方法 nk 扩增 中的 应用 | ||
【主权项】：
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