[发明专利]一种隐孢子虫蛋白激酶660 C端蛋白的制备及其应用在审
| 申请号： | 202010027841.7 | 申请日： | 2020-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN111154792A | 公开（公告）日： | 2020-05-15 |
| 发明（设计）人： | 冯耀宇;张晨远;李娜;肖立华;郭亚琼 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/54;C12N9/12 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 赵崇杨 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种隐孢子虫蛋白激酶660C端蛋白的制备及其应用，包括如下步骤：S1.以SEQ ID NO：1～2所示扩增引物PCR扩增反应得到Cp660C基因片段；S2.将Cp660C基因片段与原核表达质粒双酶切，连接，得到Cp660C重组质粒；S3.将Cp660C重组质粒转入表达宿主菌，挑取阳性克隆菌；S4.将阳性克隆菌扩大培养至生长对数期，诱导表达；S5.诱导表达后的菌液，冷冻离心收集菌体，弃上清，清洗菌体后重悬，添加蛋白酶抑制剂，冰浴超声裂解菌体，得裂解液，再低温离心取上清，滤膜过滤；S6.取步骤过滤后上清液经Ni柱纯化，洗脱，收集目的蛋白。本发明方法能够得到高纯度、高抗原特异性的重组蛋白，所纯化得到的蛋白能够进一步用于隐孢子虫蛋白功能性分析研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 孢子 蛋白激酶 660 蛋白 制备 及其 应用 | ||
【主权项】：
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