[发明专利]与叶绿体发育相关的CDA1蛋白的原核表达制备方法在审

专利信息
申请号: 202010041797.5 申请日: 2020-01-15
公开(公告)号: CN111196846A 公开(公告)日: 2020-05-26
发明(设计)人: 李慧 申请(专利权)人: 济南大学
主分类号: C07K14/415 分类号: C07K14/415;C12N15/70
代理公司: 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 代理人: 薛鹏喜
地址: 250022 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明一种与叶绿体发育相关的CDA1蛋白的原核表达制备方法,包括以下步骤:(1)对CDA1蛋白的编码基因进行优化;(2)将优化后的编码基因连入表达载体获得重组表达载体,然后将重组表达载体转入原核表达菌株中,获得工程菌,将工程菌培养至菌液A600OD值为0.5‑0.6时,加入诱导剂继续培养10‑14h;(3)取加入诱导剂培养后的菌液,离心收集菌体,用收菌缓冲液悬浮菌体;破碎菌体的细胞,离心收集上清液;将上清液进行镍离子亲和层析柱分离,得到纯化后的CDA1蛋白。本发明通过对CDA1蛋白的编码基因进行优化,使其更适合在大肠杆菌宿主中高效率表达目标蛋白;通过对原核表达条件的优化,提高了发酵液上清中的目的蛋白的表达量。
搜索关键词: 叶绿体 发育 相关 cda1 蛋白 表达 制备 方法
【主权项】:
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