[发明专利]膜蛋白AmtB的表达载体及其表达纯化方法在审
申请号: | 202010048397.7 | 申请日: | 2020-01-16 |
公开(公告)号: | CN113122557A | 公开(公告)日: | 2021-07-16 |
发明(设计)人: | 周敏;张苑桢;卢颖洪 | 申请(专利权)人: | 南京理工大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/65;C12N15/62;C07K14/245 |
代理公司: | 南京理工大学专利中心 32203 | 代理人: | 刘海霞 |
地址: | 210094 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种膜蛋白AmtB的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,包含:噬菌体T7启动子;大肠杆菌核糖体结合位点,其中包含NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白AmtB序列以及BamHI位点GGATCC;烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC;NdeI酶切位点CATATG;超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列;XhoI酶切位点CTCGAG;6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂,该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠,能够帮助氮端膜蛋白AmtB稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白AmtB的大量表达,可用于后续新型抗生素的高通量筛选。 | ||
搜索关键词: | 膜蛋白 amtb 表达 载体 及其 纯化 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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