[发明专利]膜蛋白AmtB的表达载体及其表达纯化方法在审

专利信息
申请号: 202010048397.7 申请日: 2020-01-16
公开(公告)号: CN113122557A 公开(公告)日: 2021-07-16
发明(设计)人: 周敏;张苑桢;卢颖洪 申请(专利权)人: 南京理工大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/65;C12N15/62;C07K14/245
代理公司: 南京理工大学专利中心 32203 代理人: 刘海霞
地址: 210094 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种膜蛋白AmtB的表达载体及其表达纯化方法。所述的表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,包含:噬菌体T7启动子;大肠杆菌核糖体结合位点,其中包含NcoI序列CCATGG、SEQ ID NO.1所示的大肠杆菌膜蛋白AmtB序列以及BamHI位点GGATCC;烟草蚀纹病毒半胱氨酸蛋白酶切割位点GAGAACCTGTACTTCCAATCC;NdeI酶切位点CATATG;超折叠维纳斯荧光蛋白编码序列;XhoI酶切位点CTCGAG;6个组氨酸位点以及终止密码子TAG。本发明利用分子刚性的荧光蛋白作为筛选标记以及表达进程指示剂,该荧光蛋白由于具有分子水平刚性结构可以迅速折叠,能够帮助氮端膜蛋白AmtB稳定其构象。本发明构建的表达载体能够实现膜蛋白AmtB的大量表达,可用于后续新型抗生素的高通量筛选。
搜索关键词: 膜蛋白 amtb 表达 载体 及其 纯化 方法
【主权项】:
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