[发明专利]一种从细胞裂解液中直接快速制备交联酶聚集体的方法

摘要

本发明涉及一种从细胞裂解液中直接快速制备交联酶聚集体的方法，包括下述步骤：首先将双炔交联剂溶解在异丙醇中，然后将双炔交联剂分散于掺入不同数量非天然氨基酸的醛酮还原酶突变体的细胞破碎液上清中；将装有上述混合物的容器放入配有冷却模块的微波反应器中进行反应，利用双炔交联剂与非天然氨基酸侧链反应基团间的特征反应，制得交联酶聚集体并实现目标酶蛋白的纯化。本发明通过改变突变位点的数目，获得了在不同位点掺入非天然氨基酸的突变酶，实现了精准和可控的多点交联，可有效保护酶蛋白的活性中心以及酶催化活性。本发明无需使用金属离子、有机溶剂等，安全可靠且绿色环保，很大程度节约了纯化所耗的时间和成本，适合工业化生产。