[发明专利]基于膜表面融合表达策略纯化蛋白的方法及其应用有效
| 申请号： | 202010125823.2 | 申请日： | 2020-02-27 |
| 公开（公告）号： | CN111304232B | 公开（公告）日： | 2021-04-20 |
| 发明（设计）人： | 王伍;李江辉;章丽和;王晓冰;周晓峰;姜风英 | 申请（专利权）人： | 温州医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/66;C07K1/14 |
| 代理公司： | 北京盛询知识产权代理有限公司 11901 | 代理人： | 张海青 |
| 地址： | 325000 浙江省温州市瓯海经济*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开一种基于膜表面融合表达策略纯化蛋白的方法，通过基因工程构建两种工程菌，使SUMO标签N端与一种菌的膜锚定蛋白融合，SUMO标签C端与目的蛋白融合，同时将Ulp1蛋白酶融合到另外一种菌的膜锚定蛋白上，再将两种工程菌诱导表达后离心，重悬到缓冲液并混合孵育，Ulp1蛋白酶会将目的蛋白从SUMO标签上切割下来并溶于缓冲液中，菌体及其表面锚定的SUMO和Ulp1可通过离心去除，而上清中即为纯化的目的蛋白。该纯化方法不需要破碎菌体以及层析步骤，仅通过“菌体孵育‑离心”两步就可以达到提纯蛋白的目的，该方法具有快速、简便的特点，还能得到不含任何冗余序列的天然蛋白分子，具有广泛的推广价值和应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 表面 融合 表达 策略 纯化 蛋白 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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