[发明专利]一种抗犬基质金属蛋白酶的杂交瘤细胞株及其制备方法和一种单克隆抗体及其应用有效
| 申请号： | 202010261672.3 | 申请日： | 2020-04-04 |
| 公开（公告）号： | CN111733140B | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 丁一;丁明星;王卓乐;朱红梅;杨迪琦;庄深;李桥;孙晋睿 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/20 | 分类号： | C12N5/20;C07K16/40;C12N15/70;G01N33/577;G01N33/573;C12R1/91 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 马辉 |
| 地址： | 430000 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种抗犬基质金属蛋白酶13(MMP‑13)的杂交瘤细胞株及其制备方法和一种单克隆抗体及其应用。该杂交瘤细胞株保藏号为CCTCC NO:C2019290，其分类命名为抗犬MMP‑13杂交瘤细胞株8C7，其中抗犬MMP‑13的杂交瘤细胞株通过以下方法获得：(1)采用PET‑28a(+)表达载体在IPTG的诱导下表达免疫原，以该免疫原免疫BALB/c小鼠；(2)用免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合；(3)经筛选获得分泌抗犬MMP‑13单克隆抗体的杂交瘤细胞。本发明采用Ni‑NTA‑sefinose层析柱纯化得到了高纯度的犬MMP‑13抗原，保证后续阳性克隆的筛选和抗体的产生，确立了间接ELISA法快速测定单抗的产生与效价，通过接种BALB/c雌性小鼠腹腔获取了大量单抗，该抗体具有特异性强、纯度高、均一性好等优点，在检测MMP‑13的免疫印迹方法(western blot)和免疫荧光方法中的应用效果良好。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基质 金属 蛋白酶 杂交瘤 细胞株 及其 制备 方法 单克隆抗体 应用 | ||
【主权项】：
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