[发明专利]一种基于适配体发卡触发超分支滚环扩增的细胞外囊泡检测技术

摘要

本发明公开了一种基于适配体发卡触发超分支滚环扩增的细胞外囊泡检测技术，首先以细胞外囊泡表面蛋白为靶标设计适配体发卡，以及相应的挂锁探针、连接序列和第二引物，通过挂锁探针和连接序列杂交制备环状模板，适配体发卡与细胞外囊泡孵育后，发卡结构打开，从而与环状模板结合，在加入第二引物的情况下触发超分支滚环扩增，形成大量长度梯度的双链核酸，与核酸染料SYBR GreenⅠ结合能够产生强烈的荧光信号，而且荧光信号强弱与细胞外囊泡浓度呈正相关，从而可根据荧光强度定量检测出目标细胞外囊泡，游离的适配体发卡由于无法触发扩增，无需清洗。本发明提供的细胞外囊泡检测技术方法简单，特异性高，且细胞外囊泡免洗，灵敏度高。