[发明专利]一种基于毛细管电泳筛选非天然核酸适体的方法有效
申请号: | 202010319823.6 | 申请日: | 2020-04-22 |
公开(公告)号: | CN111500572B | 公开(公告)日: | 2022-04-22 |
发明(设计)人: | 于涵洋;郑鹏;连恩晓 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12N15/115 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 柏尚春 |
地址: | 210008 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于毛细管电泳筛选非天然核酸适体的方法,包括以下步骤:首先合成初始DNA分子随机文库和引物,然后进行循环筛选。在每一轮筛选里,采用引物延伸的方法获得非天然核酸文库,以CTLA‑4为靶蛋白,将非天然核酸文库与靶蛋白共孵育,利用CE‑LIF方法分离结合靶蛋白的非天然核酸分子,然后进行逆转录和PCR扩增,获得富集DNA分子文库,并应用于下一轮筛选。如此重复筛选若干轮,对富集DNA分子进行测序,可推断得到非天然核酸分子的序列信息。最后制备单链非天然核酸分子,测试其与靶蛋白结合的亲和力,获得有特异性的非天然核酸适体。本发明方法能够高效筛选出高亲和力和稳定性的非天然核酸适体,有利于提高功能性核酸在生物环境下的作用效果。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 毛细管 电泳 筛选 天然 核酸 方法 | ||
【主权项】:
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