[发明专利]制备C1,2-位脱氢甾体化合物的方法有效
申请号: | 202010323281.X | 申请日: | 2020-04-22 |
公开(公告)号: | CN111471736B | 公开(公告)日: | 2022-01-11 |
发明(设计)人: | 苏正定;成细瑶;宋士奎;周曦 | 申请(专利权)人: | 武汉艾默佳华生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P33/02 | 分类号: | C12P33/02;C12N9/02 |
代理公司: | 北京久维律师事务所 11582 | 代理人: | 杜权 |
地址: | 430068 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供了一种制备C1,2‑位脱氢甾体化合物的方法,包括:构建表达重组KstD酶的表达载体,其中,所述重组KstD酶的氨基酸序列为SEQ ID.3;利用所述表达载体和细胞培养的方式表达所述重组KstD酶,获得粗酶液;向所述粗酶液中加入底物雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮(4‑AD),反应得到C1,2‑位脱氢甾体化合物。本发明通过对分枝杆菌HGMS2的KstD211酶进行改造,获得一种可溶性KstD融合酶;通过利用重组大肠杆菌高效表达的KstD融合酶,采用高密度发酵制备融合KstD融合酶,酶比活达到31.6U/mg。 | ||
搜索关键词: | 制备 c1 脱氢 化合物 方法 | ||
【主权项】:
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