[发明专利]一种能够稳定发光的重组载体的构建方法在审
申请号: | 202010324125.5 | 申请日: | 2020-04-22 |
公开(公告)号: | CN111549046A | 公开(公告)日: | 2020-08-18 |
发明(设计)人: | 雍金贵;喻明军;王维坤 | 申请(专利权)人: | 通用生物系统(安徽)有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/53;C12N15/12 |
代理公司: | 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 | 代理人: | 杨润 |
地址: | 239000 安徽*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种能够稳定发光的重组载体的构建方法,包括对荧光素酶基因PCR扩增,制得荧光素酶基因PCR片段;对荧光素酶基因PCR片段进行回收,制得混合液;对混合液进行纯化,制备荧光素酶DNA片段;制备绿色荧光蛋白DNA片段,将绿色荧光蛋白DNA片段和荧光素酶DNA片段与PMD‑18T载体连接,制得初级载体;将初级载体在HD5α感受态细胞中转化,挑选阳性菌落;对阳性菌落进行鉴定,获得能够稳定发光的重组载体;该重组载体的发光性稳定,用重组载体对细胞进行荧光标记后,经过细胞的不断分裂,细胞的荧光强度降低的速率小,进而保证了重组载体的发光稳定性。 | ||
搜索关键词: | 一种 能够 稳定 发光 重组 载体 构建 方法 | ||
【主权项】:
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