[发明专利]一种马尾松miRNA前体基因的克隆方法有效
| 申请号： | 202010375167.1 | 申请日： | 2020-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN111944885B | 公开（公告）日： | 2023-03-14 |
| 发明（设计）人： | 胥猛;叶友菊;徐立安;倪州献;韩炘;辛月;田雅婷 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种马尾松miRNA前体基因的克隆方法，属于植物分子生物学领域。本发明提供的马尾松miRNA前体基因的克隆方法，分别对miRNA前体基因的PCR扩增体系和PCR反应条件进行优化，退火温度控制在64‑68℃，循环次数为34‑35次，以及改变琼脂糖凝胶电泳的胶浓度、电压和电泳时间，实现成功高效地克隆马尾松miR172和miR947前体基因。本发明方法特异性强，目的基因的产量高，在前体基因的关键成熟序列区域无碱基错配现象，获得的前体基因序列与目的基因序列同源性高达100％。有利于进一步构建植物表达载体，用于转基因植物的培育，在农林作物遗传改良和分子育种方面具有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 马尾松 mirna 基因 克隆 方法 | ||
【主权项】：
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