[发明专利]液相原位荧光杂交检测大肠杆菌O157:H7的鉴定方法、试剂盒和探针在审
申请号: | 202010397457.6 | 申请日: | 2020-05-12 |
公开(公告)号: | CN111575391A | 公开(公告)日: | 2020-08-25 |
发明(设计)人: | 李可;张晓峰;帅江冰;刘斌 | 申请(专利权)人: | 浙江省检验检疫科学技术研究院 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6841;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 | 代理人: | 王静 |
地址: | 310016 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及液相原位荧光杂交检测大肠杆菌O157:H7的鉴定方法、试剂盒和探针,基于核糖体rRNA的多拷贝,及受环境稳影响较小的特性,运用NCBI数据库信息和DNASTAR软件的序列比较分析的功能,结合PNA探针设计的原则,设计了具有大肠杆菌O157特异性的肽核酸探针,并将探针N端标记荧光素,与荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术结合用于检测。同时建立了液相荧光原位杂交检测方法,并优化了杂交条件。PNA‑FISH法具有快速特点,一般整个鉴定过程耗时不超过3个小时;PNA‑FISH法的结果判断基于荧光检测和形态检测两部分,较PCR法等假阳性低,且PNA‑FISH法可省去繁琐DNA提取的步骤。 | ||
搜索关键词: | 原位 荧光 杂交 检测 大肠杆菌 o157 h7 鉴定 方法 试剂盒 探针 | ||
【主权项】:
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