[发明专利]CRISPR/RfxCas13d抗植物RNA病毒载体及其构建方法和应用在审

专利信息
申请号: 202010443155.8 申请日: 2020-05-22
公开(公告)号: CN111549054A 公开(公告)日: 2020-08-18
发明(设计)人: 李方方;曹永森;周雪平 申请(专利权)人: 中国农业科学院植物保护研究所
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;C12N15/66;C12N15/55
代理公司: 北京东方尚禾专利代理事务所(特殊普通合伙) 11844 代理人: 李厚铭
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种CRISPR/RfxCas13d抗植物RNA病毒载体及其构建方法和应用,包括pCambia1300‑RfxCas13d重组载体,构成如下:CaMV 35S启动子,潮霉素基因,CaMV poly(A)信号终止子,pVS1 RepA,pVS1复制起点,CaMV 35S启动子,RfxCas13d基因,NOS终止子;其中,RfxCas13d基因序列如SEQ ID No.1所示,NOS终止子序列如SEQ ID No.2所示。本发明利用带有GFP荧光标签的芜菁花叶病毒(TuMV‑GFP)侵染性克隆来指示RNA病毒自然侵害植物,利用RfxCas13d蛋白和sgRNA结合可以定向特定位置切割RNA。本发明构建的载体能够有效抑制TuMV的侵染,为植物病毒病的防控提供新的策略,具有重要的生产意义。
搜索关键词: crispr rfxcas13d 植物 rna 病毒 载体 及其 构建 方法 应用
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