[发明专利]一种柱式法从细胞中分离总膜的方法在审
申请号: | 202010487270.5 | 申请日: | 2020-06-02 |
公开(公告)号: | CN111621463A | 公开(公告)日: | 2020-09-04 |
发明(设计)人: | 卜汉蒙 | 申请(专利权)人: | 英文特生物技术(北京)有限公司 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;C12N5/04;C12N5/071 |
代理公司: | 北京捷诚信通专利事务所(普通合伙) 11221 | 代理人: | 王卫东 |
地址: | 100022 北京市朝阳*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种柱式法从细胞中分离总膜的方法,包括以下步骤:在低渗缓冲液或等渗缓冲液中孵育动植物细胞,使其对机械破坏敏感,形成细胞混合物;通过施加正向力或者负向力,使所述细胞混合物通过含有多孔过滤介质的过滤装置,细胞膜迅速破裂,同时保留大多数细胞核和其他细胞器;细胞器、细胞核和可溶性细胞质蛋白,以及破裂的细胞膜穿过过滤装置形成滤液,而聚集的细胞和/或组织碎片则被截留在过滤装置中;通过差速离心使所述滤液中存在的细胞膜和细胞器与可溶性胞质蛋白和细胞核进一步分离得到细胞总膜,即细胞膜和细胞器,整个过程仅需要一次孵育,不到30分钟即可完成,同时无需去污剂不会改变膜的正常构象,整个方法简单,易于实现。 | ||
搜索关键词: | 一种 柱式法 细胞 分离 方法 | ||
【主权项】:
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