[发明专利]一种创伤弧菌RPA-LFS快速检测方法的建立及应用在审
申请号: | 202010505555.7 | 申请日: | 2020-06-05 |
公开(公告)号: | CN111676302A | 公开(公告)日: | 2020-09-18 |
发明(设计)人: | 高嵩;董井泉;杨潇含;赵盼盼;董宇;王昱 | 申请(专利权)人: | 江苏海洋大学;连云港海恒生化科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京和联顺知识产权代理有限公司 11621 | 代理人: | 闫超良 |
地址: | 222000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种创伤弧菌RPA‑LFS快速检测方法的建立及应用,包括引物设计及筛选、探针设计及筛选、RPA‑LFS特异性检测、RPA‑LFS反应温度优化、RPA‑LFS反应时间优化、RPA‑LFS最低检出限测定,引物探针筛选探针长度至少46bp,所述探针5’末端用FITC进行标记,3’末端引入3C‑spacer进行末端封闭,在探针中间引入THF,即无嘌呤无嘧啶位点,所述AP位点前至少要保留30bp的碱基,AP位点之后至少有15bp的碱基,下游引物的5’末端标记生物素。本发明对检测人员的实验操作要求不高,在进行现场检测时,不需要聘请专业的技术人员,养殖场工作人员就可以进行检测,不需要凝胶成像系统等设备,既降低了检测成本,又缩短了检测实践,并且能够可视化检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 创伤 弧菌 rpa lfs 快速 检测 方法 建立 应用 | ||
【主权项】:
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