[发明专利]海滨锦葵KvNAC基因的克隆方法及其表达载体的构建方法

摘要

本发明公开了一种海滨锦葵KvNAC基因的克隆方法及其表达载体的构建方法，包括海滨锦葵总RNA的提取、海滨锦葵KvNAC基因的克隆和序列分析、RT‑PCR的反应，通过测序获得KvNAC基因全长的基因片段；根据获得的KvNAC基因全长，设计引物分离获得基因的ORF序列；选用高保真的Pfu DNA聚合酶进行PCR扩增，获得目的片段；取4μL的PCR产物与1μL的pEASY‑Blunt Cloning Vector载体进行连接反应，构建重组克隆载体。本发明简便、有效；从一个新的抗盐物种中实现了基因的分离克隆，成功对其提取了总RNA，并实现其在该植物体的空间表达模式。表达载体的构建为基因功能的研究奠定了基础。