[发明专利]一种高粱原生质体的制备方法及瞬时表达转化的方法有效
申请号: | 202010880629.5 | 申请日: | 2020-08-27 |
公开(公告)号: | CN111979173B | 公开(公告)日: | 2023-03-14 |
发明(设计)人: | 沈祥陵;曾弓剑;陆业磊;周超;张德春;吕阳;韩少鹏 | 申请(专利权)人: | 三峡大学 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;C12N15/82 |
代理公司: | 宜昌市三峡专利事务所 42103 | 代理人: | 成钢 |
地址: | 443002 *** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种以高粱BTx623幼苗为材料,以酶解法获得大量高粱原生质体及使用聚乙二醇介导法对高粱原生质体进行转化的方法。具体步骤包括:一、挑选饱满的高粱种子,消毒后种于培养基中;二、选取生长良好的高粱幼苗,去除叶和根,保留中间叶鞘部分,用刀片切成细条,在甘露醇溶液中预处理后加入酶解液进行酶解;三、酶解结束后,利用离心法富集原生质体,并重悬;四、利用聚乙二醇介导法转化所得原生质体。本发明建立了稳定高效的高粱原生质体分离及转化体系,该方法快速高效、转化率高,能够用于目的基因表达、蛋白质亚细胞定位和蛋白质互作等,为高粱的遗传改良和基因功能组研究提供了一个有力的工具。 | ||
搜索关键词: | 一种 高粱 原生 质体 制备 方法 瞬时 表达 转化 | ||
【主权项】:
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