[发明专利]一种快速鉴定二倍体基因编辑作物T0

摘要

本发明提供了一种快速鉴定二倍体基因编辑作物T0代基因型的方法，涉及基因型鉴定技术领域。本发明所述方法首先根据T0代初次Sanger测序峰图性质，针对测序结果，结合序列比对，确定基因编辑作物的纯合基因型。为了验证对嵌合体基因型的判断及区分杂合体或双等位基因突变基因型，对杂峰PCR产物进行T/A克隆，进行第二次Sanger测序；将测序结果用NCBI Blast工具与野生型序列进行比对，确定基因编辑的具体序列，验证首次Sanger测序峰图对嵌合体基因型的判定，确定杂合体和双等位基因突变基因型，从而实现了快速鉴定二倍体基因编辑作物T0代所有基因型的目的。