[发明专利]半乳糖基转移酶GalT基因点突变小鼠模型的构建方法及其用途在审
| 申请号： | 202010911812.7 | 申请日： | 2020-09-02 |
| 公开（公告）号： | CN112005968A | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 约瑟夫·弗戈迈尔;刘丽;操然 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | A01K67/027 | 分类号： | A01K67/027;C12N15/89 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 吴爽;徐冬涛 |
| 地址： | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种半乳糖基转移酶GalT基因点突变小鼠模型的构建方法及其用途，包括如下步骤：（1）靶点构建：寻找半乳糖基转移酶B4GalT基因的CDS区，明确外显子部分，确定基因突变位点；（2）获取受精卵，并进行显微注射：通过体外转录的方式，获得cas9 mRNA和gRNA，通过合成获得oligo donor DNA，将cas9 mRNA、gRNA和oligo donor DNA显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中，获得F0代小鼠；（3）将阳性F0代小鼠和C57BL/6J配繁后，得到具有B4GalT基因定点突变的阳性F1代杂合子；（4）阳性杂合子小鼠交配后经PCR测序确认获得阳性纯合子，表明小鼠模型构建成功。本发明模型制作简单，重复性好，可用于人类糖基化异常疾病的药物的研究，对探求治疗方法有重要的实际意义。 | ||
| 搜索关键词： | 半乳糖 转移酶 galt 基因 突变 小鼠 模型 构建 方法 及其 用途 | ||
【主权项】：
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