[发明专利]一种R-环结合蛋白GST-His6

摘要

本发明提供一种R‑环结合蛋白GST‑His6‑1/2×HBD及全基因组R‑环的检测方法，GST‑His6‑1/2×HBD蛋白能够用于结合和定位R‑环，采用以下步骤制备：重组质粒GST‑His6‑1/2×HBD的构建和提取；将重组质粒转入T7Express lysY/Iq感受态细胞，在2×YT培养基中培养并用IPTG诱导蛋白表达；使用Ni‑NTA beads亲和纯化GST‑His6‑1/2×HBD蛋白。借助其对R‑环结构的特异性结合能力，运用靶向剪切及转座酶技术开发出少量细胞，操作简便，信噪比更高的R‑Loop CUTTAG，以便更好地绘制内源性R‑环基因组图谱，阐释R‑环在基因组中的功能。