[发明专利]一种利用含有硒代半胱氨酸的GPI锚定蛋白表达系统及高表达重组蛋白的细胞在审
申请号: | 202010954443.X | 申请日: | 2020-09-11 |
公开(公告)号: | CN112029799A | 公开(公告)日: | 2020-12-04 |
发明(设计)人: | 藤田盛久;柳艺石 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/62;C12N15/54;C12N15/11;C12N5/10 |
代理公司: | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人: | 康伟 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用含有硒代半胱氨酸的GPI锚定蛋白表达系统及高表达重组蛋白的细胞,编码硒蛋白的基因在3'端非翻译区UTR的Sec插入序列SECIS;制备pME‑Hyg‑sHF‑特定蛋白‑Sec‑GPI‑SECIS;扩增人SELT基因的SECIS序列,并将特定蛋白基因序列与密码子TGA和人源CD59蛋白的GPI修饰序列及终止密码子TAA插入到NotI位点之后,即构建了含有硒代半胱氨酸的GPI锚定蛋白表达系统。该系统可以将可溶性重组蛋白表达到细胞膜表面,避免蛋白分泌到培养基,通过检测细胞膜表面蛋白的量分析重组蛋白的表达量,大大简化了检测和筛选高表达细胞的难度。与其它筛选系统相比,该系统将重组可溶蛋白表达在细胞膜表面,利用流式分选,筛选方便,高效。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 含有 半胱氨酸 gpi 锚定 蛋白 表达 系统 重组 细胞 | ||
【主权项】:
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