[发明专利]一种利用酵母表达系统有效表达NaD1蛋白的方法在审

专利信息
申请号: 202011063599.5 申请日: 2020-09-30
公开(公告)号: CN112195192A 公开(公告)日: 2021-01-08
发明(设计)人: 赵懿琛;杨德奕;龚伟伟;赵德刚 申请(专利权)人: 贵州大学;中国烟草总公司贵州省公司
主分类号: C12N15/81 分类号: C12N15/81;C12N1/19;C12N15/29;C07K14/415;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C12R1/84
代理公司: 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11333 代理人: 胡敬红
地址: 550025 *** 国省代码: 贵州;52
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摘要: 发明公开了一种利用酵母表达系统有效表达NaD1蛋白的方法。本发明将花烟草NaD1基因双酶切连接至pPIC9K载体的EcoR I和Not I间构建重组质粒pPIC9K‑NaD1并得到转入GS115中得到重组NaD1蛋白表达菌株,该菌株能够有效稳定和大量地表达重组NaD1蛋白,纯化后的重组蛋白总量为1mg,蛋白纯度达到85%。产物经Western Blot,SDS‑PAGE检测,实际重组蛋白分子量在20kDa左右,理论大小11kDa左右,且推测蛋白在毕赤酵母中可能发生了糖基化修饰以及存在多聚体形式。本发明通过酵母表达系统成功表达了NaD1蛋白,为进一步研究NaD1蛋白的作用机制提供实验依据。
搜索关键词: 一种 利用 酵母 表达 系统 有效 nad1 蛋白 方法
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