[发明专利]一种质粒提取试剂盒及提取方法

摘要

本发明公开了一种高纯度质粒提取试剂盒，其包括S I缓冲液、S II缓冲液、S III缓冲液、PS清洗液、洗脱缓冲液、TE 缓冲液以及新型离心柱，其中，S I缓冲液为1 M Tris‑HCl，0.5 M EDTA和1 M 葡萄糖，PH=8.0；S II缓冲液为2 M NaOH和10% SDS；S III缓冲液为3 M乙酸钾、2M盐酸胍和2M乙酸，PH=3.6‑4.2；PS清洗液为包含5‑10% TritonX‑114的异丙醇溶液；洗脱缓冲液为75%乙醇。本发明进一步提出了利用该试剂盒大量提取质粒的方法。本发明通过将新型离心柱与经典的强碱‑SDS裂解细菌细胞法结合起来使质粒DNA样品通过离心结合到纯化柱上，在一定条件下又能将质粒DNA充分洗脱，从而实现质粒的快速纯化，整个过程无需酚氯仿抽提，可以获得高纯度质粒DNA，可满足真核细胞转染的使用。