[发明专利]基于piggyBac转座子系统制备稳定表达BE4蛋白的猪肾上皮细胞系的方法在审
| 申请号： | 202011227220.X | 申请日： | 2020-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN112280802A | 公开（公告）日： | 2021-01-29 |
| 发明（设计）人： | 赵书红;熊友才;阮进学;韩晓松;庄荣志;赵广兴;李金虎;赵长志;李长春;谢胜松;李新云 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/65;C12N5/10;C12R1/91 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 江丽丽 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种稳定表达BE4蛋白的猪肾上皮细胞系的制备方法，以传代良好的猪肾上皮细胞（PK‑15）为宿主细胞，共转染含BE4融合蛋白序列的piggyBac转座子（PB‑BE4max）载体和转座酶表达载体质粒，经过嘌呤霉素筛选阳性细胞群，然后挑选单克隆细胞系，并通过扩增BE4的特征片段以及转染活性sgRNA验证编辑活性，从而得到的稳定表达BE4蛋白的转化体。利用上述方法制备的猪肾上皮细胞系能稳定表达BE4蛋白，在猪基因组功能研究、转基因猪制备、抗药靶点筛选等猪基因工程领域具有重要的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 piggybac 座子 系统 制备 稳定 表达 be4 蛋白 上皮 细胞系 方法 | ||
【主权项】：
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