[发明专利]一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法在审
申请号: | 202011253224.5 | 申请日: | 2020-11-11 |
公开(公告)号: | CN112342214A | 公开(公告)日: | 2021-02-09 |
发明(设计)人: | 张世勇;陈校辉;王明华;钟立强;段永强;徐思琪;边文冀 | 申请(专利权)人: | 江苏省淡水水产研究所 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/70 |
代理公司: | 南京瑞弘专利商标事务所(普通合伙) 32249 | 代理人: | 徐激波 |
地址: | 210017 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法,通过设计CRISPR序列,制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接,再通过体外转录方法制备sgRNA,将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵,以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列,特异性强且敲除效率高,敲除流程简单快捷,为后续解析斑点叉尾鮰zbtb38基因功能提供动物材料。 | ||
搜索关键词: | 一种 靶向 斑点 叉尾鮰 zbtb38 基因 sgrna 序列 及其 筛选 方法 | ||
【主权项】:
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