[发明专利]一种导致先天性耳聋的CRISPR/Cas9系统及其在制备模型猪核供体细胞中的应用在审
| 申请号： | 202011304451.6 | 申请日： | 2020-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN112522264A | 公开（公告）日： | 2021-03-19 |
| 发明（设计）人： | 牛冬;汪滔;马翔;曾为俊;王磊;程锐;陶裴裴;赵泽英;刘璐;黄彩云 | 申请（专利权）人： | 南京启真基因工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/62;C12N15/12;C12N5/10 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 傅婷婷;徐冬涛 |
| 地址： | 211306 江苏省南京市高淳区经*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种导致先天性耳聋的CRISPR/Cas9系统及其在制备模型猪核供体细胞中的应用。一种针对猪TMC1基因的gRNA表达载体，表达SEQ ID NO：25所示的gRNA。一种用于猪TMC1基因编辑的CRISPR/Cas9系统，包含Cas9表达载体和本发明所述的gRNA表达载体，Cas9表达载体为质粒全序列如SEQ ID NO.2所示。本发明针对猪TMC1基因设计了四个gRNA，从中筛选高效gRNA后再进行预设靶点的敲除，可有效降低后期单克隆细胞鉴定筛选的工作量，并可直接用PCR产物测序来检测基因编辑效率。采用本发明改造的Cas9高效表达载体进行基因编辑,编辑效率比原载体提高100％以上。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 导致 先天性 耳聋 crispr cas9 系统 及其 制备 模型 供体 细胞 中的 应用 | ||
【主权项】：
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