[发明专利]一种基于CRISPR/Cas13a系统的乙型肝炎病毒基因分型检测方法有效
申请号: | 202011313712.0 | 申请日: | 2020-11-20 |
公开(公告)号: | CN112375847B | 公开(公告)日: | 2023-01-24 |
发明(设计)人: | 丁显廷;郅晓;柯雨晴 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人: | 郑立 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明属于医学生物技术研究领域,本发明公开一种基于CRISPR/Cas13a系统的乙型肝炎病毒基因分型检测方法,步骤包括:1、设计crRNA序列并通过体外转录合成;2、使用NCBI Primer Blast在线工具设计HBV基因组DNA的通用型重组聚合酶扩增(RPA)引物;3、合成与纯化乙型肝炎病毒RNA;4、使用Cas13a酶和能够同时识别HBV B型和C型病毒的HBV crRNA进行检测方法的灵敏度测试;5、使用Cas13a酶和crRNA对含有HBV B型或C型基因组DNA的质粒进行酶切荧光测试。与目前常规的检测手段相比,本发明公开的方案具有操作简单,灵敏度高,价格低的特点,同时在其特异性识别区域含有额外的发卡结构,以提高检测高特异性,可以在1‑2小时内实现对HBV基因型的区分。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 crispr cas13a 系统 乙型肝炎 病毒 基因 检测 方法 | ||
【主权项】:
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