[发明专利]一种基于CRISPR/Cas13a系统的乙型肝炎病毒基因分型检测方法有效

专利信息
申请号: 202011313712.0 申请日: 2020-11-20
公开(公告)号: CN112375847B 公开(公告)日: 2023-01-24
发明(设计)人: 丁显廷;郅晓;柯雨晴 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11
代理公司: 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 代理人: 郑立
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明属于医学生物技术研究领域,本发明公开一种基于CRISPR/Cas13a系统的乙型肝炎病毒基因分型检测方法,步骤包括:1、设计crRNA序列并通过体外转录合成;2、使用NCBI Primer Blast在线工具设计HBV基因组DNA的通用型重组聚合酶扩增(RPA)引物;3、合成与纯化乙型肝炎病毒RNA;4、使用Cas13a酶和能够同时识别HBV B型和C型病毒的HBV crRNA进行检测方法的灵敏度测试;5、使用Cas13a酶和crRNA对含有HBV B型或C型基因组DNA的质粒进行酶切荧光测试。与目前常规的检测手段相比,本发明公开的方案具有操作简单,灵敏度高,价格低的特点,同时在其特异性识别区域含有额外的发卡结构,以提高检测高特异性,可以在1‑2小时内实现对HBV基因型的区分。
搜索关键词: 一种 基于 crispr cas13a 系统 乙型肝炎 病毒 基因 检测 方法
【主权项】:
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