[发明专利]一种构建MSH2基因敲除细胞系的方法在审
申请号: | 202011373830.0 | 申请日: | 2020-11-30 |
公开(公告)号: | CN112501169A | 公开(公告)日: | 2021-03-16 |
发明(设计)人: | 李军;程扬;项阳;赵家顺 | 申请(专利权)人: | 武汉爱博泰克生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/66;C12N5/10 |
代理公司: | 湖北天领艾匹律师事务所 42252 | 代理人: | 杨建军 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二*** | 国省代码: | 湖北;42 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | 本发明涉及一种构建MSH2基因敲除细胞系的方法,涉及基因工程技术领域。所述方法是采用CRISPR/Cas9系统来制备MSH2基因敲除细胞系,首先针对MSH2基因设计两个sgRNA序列,利用分子克隆技术构建重组质粒;然后将重组质粒转染至HeLa细胞,通过PCR验证sgRNA的活性后,进行嘌呤霉素药物筛选和单克隆化处理,然后提取单克隆细胞株基因组DNA以及总蛋白,进行MSH2基因水平测序鉴定以及蛋白水平表达检测,获得MSH2基因敲除HeLa细胞系。本发明构建的MSH2基因敲除HeLa细胞系是一种基因稳定遗传的细胞系。本发明提供的方法可用于MSH2基因的定向敲除致使其功能失活,具有简便、高效、快速、低成本等特点,对于MSH2基因功能和相关通路的研究具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 构建 msh2 基因 细胞系 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于武汉爱博泰克生物科技有限公司,未经武汉爱博泰克生物科技有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/202011373830.0/,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:无线胶囊内窥镜的追踪定位方法及系统
- 下一篇:胶粘剂及其制备方法和胶带