[发明专利]一种糖基转移酶突变体及其催化合成莱鲍迪苷A的方法有效
申请号: | 202011388873.6 | 申请日: | 2020-12-02 |
公开(公告)号: | CN112375750B | 公开(公告)日: | 2022-06-03 |
发明(设计)人: | 李艳;贾红华;余杰;孙萍;齐雪莲;严明 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/56;C12P19/18;C12R1/19 |
代理公司: | 南京新慧恒诚知识产权代理有限公司 32424 | 代理人: | 王月霞 |
地址: | 211816 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其催化合成莱鲍迪苷A的方法,所述原糖基转移酶的氨基酸序列:SEQ ID NO:1,本实验从UGT76G1的表面残基Q、N、T出发,并结合溶剂可及表面面积、B‑因子等方面数据分析结果,在所得预测的基础上,筛选出Asn196,Asn78,Asn400,Asn69,Gln72,Gln198,Gln178,Gln160,Thr319,Thr 81中的单点或多点迭代突变,最终筛选出较好的突变菌株76G1_Q72E‑N196D‑T319E的UGT‑SuSy体系,实现高效催化合成莱鲍迪苷A。将糖基转移酶UGT76G1或其突变体基因于蔗糖合酶基因连接得到重组质粒,构建双酶共表达的重组菌株。通过构建双酶系统,实现体内UDPG的再生,有效解决了昂贵糖基供体的来源问题,降低了成本,推动了生物技术工业的应用。该突变体制备简单,实现短时间高效催化合成莱鲍迪苷A,且生物酶催化方法绿色环保无污染,更适合于现在绿色工业加工生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 糖基转移酶 突变体 及其 催化 合成 莱鲍迪苷 方法 | ||
【主权项】:
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