[发明专利]一种高产β-丙氨酸的基因工程菌及共培养制备D-泛酸有效
申请号: | 202011400372.5 | 申请日: | 2020-12-04 |
公开(公告)号: | CN112625985B | 公开(公告)日: | 2022-05-31 |
发明(设计)人: | 柳志强;陈力;张博;李波;王培;郑裕国 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/60;C12N15/54;C12P39/00;C12P13/06;C12P13/02;C12R1/19 |
代理公司: | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人: | 冷红梅 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及一种高产β‑丙氨酸的基因工程菌及共培养制备D‑泛酸及其构建方法,及其在共培养制备D‑泛酸中的应用。本发明通过利用来源于pTrc99A的Trc启动子和RBS序列替换基因组上panD、aspC,ppc基因的原有启动子以加强β‑丙氨酸的合成,并敲除基因pykA,pykF阻断PEP的消耗和改造大肠杆菌的葡萄糖摄取途径,加强非PTS转运系统而阻断PTS转运系统,积累合成的前体PEP;在此基础上引入异源的天冬氨酸脱羧酶基因panD,E.coli W3110的aspC以加强关键酶的酶活,增强β‑丙氨酸前体供给及转化,引入E.coli W3110的gdhA基因从而加强了辅酶NADP/DNAPH的循环再生,最终β‑丙氨酸的效价从0提高到2.48g/L。该菌株与之前的D‑泛酸生产菌株DPA21/pBCST3进行初步共培养体系的构建,进行了接种比例的优化,两个菌株接种比在1:1时,共培养菌株可以在同样的发酵培养基中生产3.08g/L的D‑泛酸。 | ||
搜索关键词: | 一种 高产 丙氨酸 基因工程 培养 制备 泛酸 | ||
【主权项】:
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