[发明专利]一种基于多步等温循环扩增的17β-雌二醇超灵敏检测方法和试剂盒有效
申请号: | 202011453030.X | 申请日: | 2020-12-11 |
公开(公告)号: | CN112359095B | 公开(公告)日: | 2022-11-15 |
发明(设计)人: | 白家磊;吴瑾;刘明珠;赵尊全;高志贤;彭媛;宁保安;王伟亚 | 申请(专利权)人: | 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所 |
主分类号: | C12Q1/682 | 分类号: | C12Q1/682;C12Q1/6844;G01N33/53 |
代理公司: | 北京思创大成知识产权代理有限公司 11614 | 代理人: | 高爽 |
地址: | 300050*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明属于雌激素检测领域,涉及一种基于多步等温循环扩增的17β‑雌二醇超灵敏检测方法和试剂盒。该方法包括以下步骤:S1.构建复合DNA修饰的磁珠;S2.合成环DNA;S3.多步等温循环扩增;将含有E2的待测溶液与复合DNA修饰的磁珠混合反应,反应后将溶液进行磁分离,取溶液的上清液,加入模板DNA、链置换扩增的限制性核酸内切酶、具有链置换活性的DNA聚合酶和dNTPs混合孵育并反应后,加入circ‑DNA、滚环扩增用酶、dNTPs、分子信标进行滚环扩增和分子信标的识别;然后采用荧光分光光度计测荧光值。本发明的方法无需复杂仪器检测,产物稳定性高、成本较低,该方法检测限可达到15.85fg/mL,达到超灵敏检测的要求。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 等温 循环 扩增 17 雌二醇 灵敏 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
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