[发明专利]一种Il21基因敲除小鼠模型及其构建方法、应用在审

专利信息
申请号: 202011540705.4 申请日: 2020-12-23
公开(公告)号: CN112662669A 公开(公告)日: 2021-04-16
发明(设计)人: 史培良;樊皓月;辛闻婷 申请(专利权)人: 成都药康生物科技有限公司
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/85;C12N15/89;C12N5/10;A01K67/027;A01K67/02;A61K49/00
代理公司: 成都行之专利代理事务所(普通合伙) 51220 代理人: 唐邦英
地址: 610000 四川省成都市温江区成都海峡两岸科技*** 国省代码: 四川;51
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摘要: 发明公开了一种Il21基因敲除小鼠模型及其构建方法、应用,构建方法包括以下步骤:S1、基于CRISPR/Cas9技术,确定Il21基因的敲除区域,根据确定的敲除区域设计特异性靶位点sgRNA1和sgRNA2,gRNA1和gRNA2的基因序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;S2、将有活性的gRNA1、gRNA2、cas9蛋白显微注射入小鼠受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕雌鼠体内,待其怀孕产仔获得F0代小鼠;S3、将步骤S2获得的F0代小鼠与野生型小鼠交配,获得的F1代杂合子;S4、将步骤S3获得的F1代杂合子近交获得F2代小鼠即为IL21基因敲除小鼠模型。本发明基于CRISPR/Cas9技术,通过设计合理的异性靶位点gRNA1和gRNA2基因序列,首次通过敲除Il21基因的ENSMUST00000029273.7转录本中exon3‑exon5区域建立了小鼠动物模型,能够在肿瘤愈后相关研究中的应用。
搜索关键词: 一种 il21 基因 小鼠 模型 及其 构建 方法 应用
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