[发明专利]一种基于MALDI-TOF-MS体外筛选CDKs家族蛋白激酶抑制剂的方法有效
| 申请号： | 202011599491.8 | 申请日： | 2020-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN112831542B | 公开（公告）日： | 2022-10-14 |
| 发明（设计）人： | 高祥;张展鸣;陈春景;卿萍 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48;G01N33/68;G01N27/626 |
| 代理公司： | 广东金泰智汇专利商标代理事务所(普通合伙) 44721 | 代理人： | 江丽娇 |
| 地址： | 361005 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于MALDI‑TOF‑MS体外筛选CDKs家族蛋白激酶抑制剂的方法，包含以下步骤：首先制备CDKs体外磷酸激酶实验缓冲液(KRB)的母液；然后加入待测药物样品进行体外磷酸激酶反应制备质谱分析样品；最后通过MALDI‑TOF‑MS检测来比较样品中磷酸化的短肽和未磷酸化的短肽离子峰的峰面积大小来判断待测药物抑制CDKs的体外活性。本发明所提供的方法是利用药物样品与细胞提取的蛋白激酶在ATP的帮助下进行体外磷酸化对应的底物短肽，然后利用质谱检测出磷酸化的短肽和未磷酸化的短肽，两者的峰面积比反映了抑制CDKs的活性大小。发明所提供的方法采用体外实验和MALDI‑TOF‑MS检测磷酸化结果，样品需求少，药物用量少，不用进行复杂的细胞实验，还可进行大规模的样品筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 maldi tof ms 体外 筛选 cdks 家族 蛋白激酶 抑制剂 方法 | ||
【主权项】：
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