[发明专利]一种分枝杆菌的17β-羟基类固醇脱氢酶突变体和工程菌及其应用

摘要

本发明公开了一种分枝杆菌的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体和工程菌及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将分枝杆菌(Mcobacterium sp.)LY‑1的17β‑羟基类固醇脱氢酶17β‑HSDy的L173位点突变成了缬氨酸，得到突变体17β‑HSDy2，并将此突变体进行外源表达，重组菌B.Subtilis‑pMA5‑17β‑HSDy2的比酶活达到6882.45U·mg‑1，酶活提高16.4％。本发明还提供了突变体17β‑HSDy2的增强表达菌株，以pMV261为增强表达质粒，实现了突变体17β‑HSDy2在分枝杆菌LY‑1中的增强表达，相较于原始菌株显著的降低了9α‑羟基雄甾烯‑4‑烯‑3，17‑二酮的积累，提高了睾酮积累。该增强表达菌株还可用于雄甾烯‑4‑烯‑3，17‑二酮转化睾酮的生产，具有潜在工业应用。