[发明专利]一种双sgRNA结合RecET系统敲除盐单胞菌DNA大片段的方法在审
| 申请号： | 202110011391.7 | 申请日： | 2021-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN114717233A | 公开（公告）日： | 2022-07-08 |
| 发明（设计）人： | 韩静;向华;徐桐;陈国强 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N9/22;C12N15/55;C12N15/74;C12N1/21;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 魏少伟 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种双sgRNA结合RecET系统敲除盐单胞菌DNA大片段的方法。本发明公开的敲除盐单胞菌DNA大片段的方法中，所敲除DNA大片段大于等于10kb，该方法包括：将具有如下1)‑4)特征的重组载体导入出发盐单胞菌中，实现DNA大片段的敲除；1)能转录sgRNA1与sgRNA2，sgRNA1与sgRNA2分别靶向所敲除DNA大片段的两端；2)含有出发盐单胞菌中所敲除DNA大片段的上游同源臂和下游同源臂；3)能表达Cas9；4)能表达RecE蛋白质和RecT蛋白质。本发明解决了目前盐单胞菌中无法实验大片段DNA敲除的问题，具有广泛的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 sgrna 结合 recet 系统 盐单胞菌 dna 片段 方法 | ||
【主权项】：
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