[发明专利]一种SalI限制性内切酶的制备方法在审
申请号: | 202110020913.X | 申请日: | 2021-01-08 |
公开(公告)号: | CN112813087A | 公开(公告)日: | 2021-05-18 |
发明(设计)人: | 于博文;李建辉;单永超 | 申请(专利权)人: | 上海咏科生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N9/22;C12N15/62;C12R1/19 |
代理公司: | 上海宛林专利代理事务所(普通合伙) 31361 | 代理人: | 张明 |
地址: | 201100 上海市闵*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种SalI限制性内切酶的制备方法,包括以下步骤:一、合成SalIM和SalI的编码基因,分别如SEQ ID NO.1所示和SEQ ID NO.2所示,分别构建至相应载体中,获得带有SalIM基因的重组载体和融合了纯化标签的SalI蛋白表达质粒;二、将带有SalIM基因的重组载体转入大肠杆菌中,获得具备基底SalIM表达的重组菌,保护基因组DNA不被SalI内切酶切割,使大肠杆菌能够继续正常生长增殖,从而提高SalI的表达量。三、制作成具备基底SalIM表达的重组菌感受态细胞;四、将融合了纯化标签的SalI蛋白表达质粒转入具备基底SalIM表达的重组菌感受态细胞中,获得阳性单克隆,培养进行SalI限制性内切酶的表达;五、SalI限制性内切酶的纯化。 | ||
搜索关键词: | 一种 sali 限制性 内切酶 制备 方法 | ||
【主权项】:
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