[发明专利]一种PBMC的CFSE染色方法及其应用在审
申请号: | 202110086248.4 | 申请日: | 2021-01-22 |
公开(公告)号: | CN112725271A | 公开(公告)日: | 2021-04-30 |
发明(设计)人: | 朱灏 | 申请(专利权)人: | 华夏源细胞工程集团股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078;C12Q1/02 |
代理公司: | 上海微策知识产权代理事务所(普通合伙) 31333 | 代理人: | 张静 |
地址: | 201100 上海市闵行*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种PBMC的CFSE染色方法所述方法包括以下步骤:S1,冻存PBMC的复苏:将PBMC冻存管融化、离心,弃去上清液,加入培养液重悬PBMC并计数;S2,PBMC的CFSE染色:调整PBMC的细胞浓度,量取一定体积的细胞悬液,加入CFSE染色液,染色5‑10min,再加入预冷的染色终止液,离心、弃去上清液、加入的完全培养基重悬。在本发明中利用CFSE与赖氨酸侧链或其他氨基基团反应,共价偶联至细胞内和细胞表面的蛋白,在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中这一特性,对细胞进行标记,可准确检测出细胞增殖情况。采用本发明中所述的PBMC的CFSE染色方法,对细胞增殖影响小,有利于后续的共培养过程。 | ||
搜索关键词: | 一种 pbmc cfse 染色 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
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