[发明专利]一种乐伐替尼耐药基因DUSP9、其筛选方法及应用有效

专利信息
申请号: 202110117062.0 申请日: 2021-01-25
公开(公告)号: CN113046357B 公开(公告)日: 2023-05-16
发明(设计)人: 卢永刚;张洁;何沙;刘永东;孙一帆;黄文杰;陈贤华;孙林;肖笑荣 申请(专利权)人: 柳州市柳铁中心医院
主分类号: C12N15/12 分类号: C12N15/12;C12N15/10;C12N15/867;C12N5/10;C12Q1/02
代理公司: 南宁新途专利代理事务所(普通合伙) 45119 代理人: 朱肖凤
地址: 545007 广西壮族*** 国省代码: 广西;45
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摘要: 发明涉及肿瘤耐药基因技术领域,特别涉及一种乐伐替尼耐药基因DUSP9、其筛选方法及应用,DUSP9的基因的序列为SEQ ID NO:1。其筛选方法包括以下步骤:进行预实验,获得sgRNA文库的最佳MOI,确定乐伐替尼的浓度;进行感染Cas9文库实验,得到稳定株;稳定株加入乐伐替尼处理,通过PCR扩增和高通量测序,分析sgRNA的富集情况;筛选乐伐替尼耐药基因;有效靶基因对肝癌细胞功能表型及介导乐伐替尼耐药的作用验证。本发明通过CRISPR/Cas9全基因文库筛选得到乐伐替尼的耐药基因,为今后减少乐伐替尼耐药性提供了理论依据,为乐伐替尼的临床应用提供了新的耐药靶点,为临床合理用药提供指导。
搜索关键词: 一种 乐伐替尼 耐药 基因 dusp9 筛选 方法 应用
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